干货 | 滴定分析方法的开发验证及案例分析

分析方法案例分析开发验证

药通社

2023/03/28

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最近做的几个口服固体制剂的项目，都用到滴定分析，发现有些人对滴定分析方法的开发和验证还不是特别了解，在这里我简单把自己的经验总结了一下。

我们在高中就学过四大滴定：酸碱滴定法、络合滴定法、氧化还原滴定法、沉淀滴定法。滴定法的优点是操作简单，准确度高，重复性好，能定量分析，对仪器的要求不高，便于推广。缺点是在药物分析这块来讲，不如液相和气相一样能够很直观的进行审计追踪，不过随着科技的发展，有些能够实行审计追踪，有些仪器譬如梅特勒自动电位滴定仪（如V30）能自动滴定，配备自动的小型打印机，能即时记录消耗滴定液的体积，现在很多药厂或者研发机构的电子天平也都配备小型打印机，或者进一步来讲的话，录像也是一个可以审计追踪的方法，不过录像的普及还是需要一个很长的道路要走。

言归正传，说说制剂研发的思路。

一：分析方法的开发：

首先我们需要进行文献调研，对文献方法的一个重复，但是也不一定得完全采用文献的方法，需要根据自己项目的实际情况进行对比优化。又或者文献资料并不是我们所要的资料，譬如做的项目是复方聚乙二醇电解质散（儿童型），但是目前国内外没有查到相关的分析方面的文献，但是查到了复方聚乙二醇电解质散（Ⅱ）和复方聚乙二醇电解质散（Ⅲ）的参考文献，虽然处方组成及配比不同，但是有些处方种类是近似的，因此就需要根据文献对比检测方法，然后进行优化。

1：滴定管的选择

消耗滴定液消耗的体积及滴定管的选择是很重要的指标，为什么我们选定的分析需要消耗滴定液最低8ml起步呢：

这个通过一个简单的换算就可以知道：药典上1毫升相当于20滴，一滴也就是0.05ml。我们按照半滴0.02毫升计算。咱们来看消耗半滴的量的检测的误差

滴定法误差计算：

从结果来看，滴定体积越大，重复性及准确就越高，检测误差越小。

2：滴定剂的浓度的选择

我们是做药物分析的，一般我选择中国药典上收载的滴定剂浓度，不进行调整或更改，这样保证滴定液的使用有来源。譬如盐酸滴定液，药典上有如下滴定液的配置（1mol/L、0.5mol/L、0.2mol/L、0.1mol/L），并且药典上也明确说，如果需要盐酸滴定液（0.05mol/L、0.02mol/L、0.01mol/L）时，可取盐酸滴定液（1mol/L或0.1mol/L）加水稀释制成。必要时标定浓度。假如由于滴定剂的浓度的选择，导致消耗的体积不是我们需要的体积时，简单来讲，以上药典上收载的滴定液的浓度依然达不到我想要的结果，就可以调整样品的称量，也可以调整移液的体积增加或者减少检测样品的浓度，以与滴定液的消耗体积进行匹配。

二、分析方法的验证

分析方法确定后，需要进行分析方法的验证。

1、首先做专属性试验，专属试验的目的，是为了证明空白溶剂或者辅料等不干扰样品的测定，或者干扰了不得过2.0%。如果是对于原料的检测的话，其中空白是在不加样品的情况下，按照同法进行操作所得的结果。制剂的空白指的是除了被测成分，其他全是全辅料，以3个不同剂型案例，告诉大家不同的样品，怎样做专属试验。

2、线性试验：应该在设计的范围内测定线下关系，一般液相或气相的线性可以用同一贮备液逐步稀释，也可以分别称取对照品，制备一系列的浓度，是要求至少制备5份不同浓度水平，进行线性回归，但是容量法的线性，《欧洲药典质量标准的起草技术指南》2005年版，明确提出对至少7份不同重量的供试品进行滴定。滴定终点消耗的滴定液体积应为所用滴定管体积的20~90%。

通过线性回归方程对依赖于供试品重量（m）的滴定终点体积（v）进行评价，获得线性回归方程并用斜率进行表示（bobs），通过与理论（给定的滴定常数）斜率（btheor）之间的偏差进行判断。

对于电位滴定法，测定的值与理论值的相对偏差不得过0.3%，采用指示剂法，相对偏差不得过0.5%。

3、准确度：分别配制浓度为80%、100%和120%（如制剂需要测定含量均匀度，应为测试浓度的70%、100%和130%）的供试品溶液各3份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。这个要求和液相或者气相的要求是一致的，但是这里需要强调一点的是，我们常规的方法一般是称取一定的固体标准品和全辅料，同含量的配制方法进行回收试验，但是有的比较特殊，譬如，盐酸莫西沙星氯化钠注射液项目，称取氯化钠对照品和盐酸莫西沙星对照品置量瓶中，由于同离子效应，导致盐酸莫西沙星原料不能完全溶解，因此需要模仿制剂工艺，先将盐酸莫西沙星溶解，然后加入氯化钠溶液的方式进行回收试验，因此具体的项目需要根据具体情况具体分析。

4、重复性：制剂中含量的重复性和液相及气相色谱一样，通过平行配制6份样品，所得含量的结果的RSD进行验证，这个就不需要过多解释。

5、溶液稳定性考察：关于容量法溶液稳定性考察，一般不需要做，因为对于操作简单，反应灵敏的滴定法，配置完样品一般也都很快测了，不会放置太长时间。除非有特别情况。