ICE靶标蛋白| EGFR系列蛋白产品_摩熵医药(原药融云)

ICE靶标蛋白| EGFR系列蛋白产品

EGFR是表皮生长因子受体（HER）家族成员之一,是细胞增殖、分化和存活的主要调节因子。在未刺激条件下，EGFR以无活性单体形式存在。然而，在配体结合后，它可以与其他 EGFR 家族蛋白形成同源二聚体或异二聚体。受体二聚化对于 EGFR 的 C 端尾部特异性酪氨酸残基的激酶激活和磷酸化至关重要。在脑肿瘤中经常观察到高丰度的EGFR 和大的内部缺失，而激酶结构域内的点突变和小插入在肺癌中很常见，由于 EGFR 在多种癌症类型中经常过表达和/或突变，因此是许多特异性靶向疗法开发的靶点。

爱思益普已表达纯化EGFR

系列活性蛋白可供选择

图1. ICE已构建的EGFR及其突变蛋白家族的生化实验

蛋白产品案例展示

EGFR[d746-750/T790M/C797S]

A:生产流程：

EGFR[d746-750/T790M/C797S]在HEP sf9 高表达昆虫细胞中进行表达。

图2. EGFR[d746-750/T790M/C797S]生产流程图

B:常规QC结果：

SDS-PAGE检测EGFR[d746-750/T790M/C797S]的纯度在90%以上。

图3. EGFR[d746-750/T790M/C797S] SDS-PAGE结果图

C:活性验证结果：

HTRF法对EGFR[d746-750/T790M/C797S]蛋白分别进行酶滴和阳性药的验证，EGFR[d746-750/T790M/C797S]具有良好的活性，满足实验需求。

图4. HTRF法活性测定

图5. Afatinib, Osimertinib,BLU-945 和EAI-045在EGFR[L858R/T790M]和EGFR上的IC50结果

爱思益普EGFR系列蛋白产品列表

更多产品信息请访问爱思益普蛋白商城查询：https://protein.ice-biosci.com/

除了丰富的现货产品，同时可以提供克隆-表达-纯化-质控-活性测定一体化蛋白定制服务。以满足您对蛋白序列、标签或修饰以及不同应用场景的个性化需求。

EGFR 背景介绍

1、简介

EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号传导的受体。EGFR属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR,HER2,HER3和HER4。EGFR也被称作HER1、ErbB1，突变或过表达一般会引发肿瘤。EGFR是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体。EGFR位于细胞膜表面，靠与配体结合来激活，包括EGF和TGFα。激活后，EGFR由单体转化为二聚体。EGFR二聚后可以激活它位于细胞内的激酶通路，包括Y992, Y1045, Y1068, Y1148 and Y1173等激活位点。这个自磷酸化可以引导下游的磷酸化，包括MAPK，Akt和JNK通路, 诱导细胞增殖。受体激活对于皮肤的免疫来说很重要。研究表明在许多实体肿瘤中存在EGFR的高表达或异常表达。EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。

EGFR受体可激活三个信号通路：参与免疫调节的JAK/STAT信号通路，参与细胞增殖的RAS-RAF-MEK途径（MAPK/ERK通路），以及参与细胞存活的PI3K-AKT-mTOR途径。RAS-RAF-MEK途径负责控制基因转录活动和细胞循环周期，而PI3K-AKT-mT0R途径可激活抗细胞凋亡的信号。因此，EGFR受体蛋白在细胞增殖及存活上有着非常重要的作用。三种信号通路是细胞内信号转导的基础，调控肿瘤细胞诸多生理变化如：分裂、分化、生长以及迁移等。

图6.EGFR受体蛋白激活JAK-STAR、RAS-RAF-MEK和PI3K-AKT-mTOR信号通路示意图

2、蛋白结构

EGFR的结构EGFR是一个含有1186个氨基酸的跨膜糖基化蛋白，其结构由三个部分组成：胞外结构域（N端），穿膜结构域（TM，疏水的α螺旋结构）和胞内结构域（JM、TK、C端）。胞外区为N端的621个氨基酸残基，包含配体EGF的结合域，并进一步细分为Ⅰ至Ⅳ区域；跨膜区由23个氨基酸残基构成螺旋状结构的疏水区，通过一个脯氨酸与胞外区相连，将受体固定于胞膜上；胞内区共用542个氨基酸残基，分为近膜区、酪氨酸蛋白激酶区和C末端3部分。

图7.EGFR结构示意图

3、抑制剂研究进展

从第一个EGFR-TKI研制出来到现在几十年，已有十多种EGFR-TKIs应用于临床治疗NSCLC。但分子靶向药物治疗出现的耐药现象，为癌症患者后续治疗带来了挑战。充分了解耐药机制设计开发新一代EGFR-TKIs潜力巨大，如第四代变构抑制剂的一个潜在优势是避免了与细胞内ATP竞争与催化位点的结合，从而增加了开发更强效和更特异抑制剂的可能性。EGFR-TKIs与其它药物的联合使用可以阻断多个信号通路，具有协同增效的作用，但联合用药临床获益还有待更多的研究论证。

图8.EGFR突变基因的发展和药物开发时间表

根据结合口袋类型，EGFR抑制剂可分为靶向催化位点抑制剂和靶向变构位点抑制剂，前三代抑制剂都是靶向催化位点，第四代EGFR抑制剂的作用原理在于它们能够针对这些新的耐药突变，这些抑制剂通常设计为能够与EGFR蛋白的活性位点以及突变位点同时结合，或者通过变构位点结合来抑制EGFR的活性。

第一、第二代EGFR-TKI在临床上主要用于EGFR-L858R和EGFR-Del19单突变和双突变的治疗，是ATP的竞争性抑制剂。第一代代表药物有吉非替尼(Gefitinib)和埃罗替尼(Erlotinib)；第二代为不可逆的EGFR-TKIs，代表药物如阿法替尼(Afatinib)、达克替尼(Dacomitinib)。

随着治疗的不断进行，第一、第二代EGFR-TKI最常见的耐药机制是EGFR20号外显子获得性T790M突变，导致抑制剂与EGFR的ATP口袋结合力减弱。另外，T790M突变增加了EGFR-L858R突变体与ATP的亲和力。专门针对EGFR-T790M突变开发出第三代EGFR-TKIs，如奥希替尼(Osimertinib,AZD9291)、拉泽替尼(Lazertinib,YH25448)、阿美替尼(Aumolertinib,HS10296)和伏美替尼(Furmonertinib,AST2818)。

研究显示EGFR上第20号外显子编码的酪氨酸结构域797位半胱氨酸突变为丝氨酸(C797S)，该突变阻止了不可逆共价键的形成，是产生耐药的主要机制。EAI045是第一个针对T790M和C797S突变的选择性小分子变构抑制剂，单药治疗时疗效不明显，与西妥昔单抗联用对EGFR-Del19/T790M/C797S三重突变荷瘤小鼠NSCLC模型有效。由于联合使用的不良反应较大，且对EGFR-Del19/T790M疗效不佳，目前该药已停止研发。

在EAI045结构的基础上进行结构优化，得到了开发出对EGFR突变有效的新型变构抑制剂JBJ-04-125-02，它作为单药可以在体外和体内抑制细胞增殖和EGFR-L858R/T790M/C797S突变，奥希替尼与JBJ-04-125-02联用的疗效更高。对JBJ-04-125-02进行改造，得到更高效的EGFR变构抑制剂JBJ-09-063，相比于JBJ-04-125-02和奥希替尼(第三代EGFR-TKI)，JBJ-09-063对EGFR-L858R/T790M和EGFR-L858R/T790M/C797S的抑制作用更强，且不受EGFR-C797S突变的影响。

BLU-945是一种高效、高选择性的第四代EGFR-TKI，在奥希替尼耐药的EGFR突变移植模型中展现出强大的抗肿瘤活性，可以有效地抑制EGFR-L858R/T790M、EGFR-L858R/T790M/C797S、EGFR-Del19/T790M/C797S突变，目前其I/II临床试验正在进行中。

CH7233163被证明能有效抑制EGFR-Del19/T790M/C797S三突变和EGFR-L858R/T790M/C797S三突变、双突变和单突变，极大的有益于奥希替尼耐药患者，具有临床评估潜力。

TQB3804显示出对EGFR-T790M/C797S强有效的抑制活性，并将进行相应临床研究。BBT-176对EGFR-Del19/T790M/C797S和EGFR-L858R/T790M/C797S三重突变均具有显著的抑制作用，目前处于I期临床研究。

Reference

1. Hynes N .ERBB receptors and cancer: the complexity of targeted inhibitors.[J].Nature Reviews Cancer, 2005, 5(5):341.DOI:10.1038/nrc1609.

2. Scaltriti M , Baselga J .The epidermal growth factor receptor pathway: a model for targeted therapy.[J].Clinical Cancer Research, 2006, 12(18):5268-5272.DOI:10.1158/1078-0432.CCR-05-1554.

3. Wang L , Zhang G , Qin L ,et al.Anti-EGFR Binding Nanobody Delivery System to Improve the Diagnosis and Treatment of Solid Tumours[J].Recent Patents on Anti-Cancer Drug Discovery, 2020.DOI:10.2174/1574892815666200904111728.

4. 胡亚南.小分子EGFR-TKIs在非小细胞肺癌治疗中的研究进展[J].药物资讯, 2024, 13(1):1-9.

公司介绍

北京爱思益普生物科技股份有限公司 2010年创建，致力于打造靶点驱动的药物发现生物学平台。作为创新型CRO+的探索者，爱思益普专注于以“新靶点、新方法、新技术”解决创新药从靶点发现到候选化合物确认阶段的生物学和成药性的挑战；同时，爱思益普融合临床医学和生物学的专业团队，基于对疾病生物学及药物研发逻辑的深入理解，建立药物发现“一体化”的生物学平台为客户提供综合解决方案。爱思益普关注新药研发企业对质量、效率和成本的需求，用专业的生物学技术和高效的沟通帮助客户提高新药研发的效率及成功率。

爱思益普建立的技术平台包括：

1、基于靶点的药物筛选平台：建立了超过1500种药物靶点，涵盖大多数离子通道，GPCR，激酶和非激酶靶点以及近万个实验方法，建立了从生物物理学、生物化学、细胞生物学、电生理学平台以及各种多平台和高通量筛选技术。

2、体外和体内药效筛选评价平台：包括肿瘤、免疫、心血管、中枢神经系统、代谢基于细胞、组织或动物模型的药效学评价。

3、早期成药性筛选评价平台：包括药物发现阶段ADME和PK研究，以及药物脱靶效应筛选（hERG，safety panel，激酶谱等）

4、新分子平台：专注于ADC、多肽、蛋白降解、小核酸、细胞治疗等多种新分子的药物发现研究。