唯思尔康人源细胞外囊泡检测试剂盒（化学发光）重磅上市！

细胞外囊泡（EVs）是细胞释放的纳米至微米级别的膜囊泡。它们通过促进蛋白质、脂质、DNA、RNA和miRNA等生物分子在细胞之间的转移，在细胞间通讯中发挥着至关重要的作用，实现了遗传信息、信号分子和细胞组分的交换。通过这些机制，EVs参与了多种生理过程，如免疫调节、组织再生和神经通讯。由于其能够在细胞之间转移各种生物载荷，因此在诊断和治疗应用中具有巨大潜力。

图片 TEM image of EVs and protein aggregates in harvested cell culture fluid sample

相较于EV广泛的应用前景，其大规模生产和纯化依然存在较大的挑战。在EV的生产中，最普遍的EV定量方法是纳米轨迹分析（NTA）。NTA基于激光于粒子的光散射，通过分析粒子的布朗运动获得粒子的体积和浓度信息，被广泛应用于EV定量。然而，我们发现作为EV生产原料的细胞上清收获液中存在大量和EV体积相近的蛋白聚集杂质（如上图所示），而NTA无法有效区分其与EV产生的信号，无法做到准确定量，从而对EV生产中的上、下游工艺开发产生了难度。市面上存在很多其他的EV定量方法，例如纳米流式细胞分析（nanoFCM）虽然可以有效区分EV与颗粒杂质，但其高昂的仪器价格与较低的通量限制了它的应用。

为解决这一问题，我司开发了Total human EV (CLIA) ELISA kit 人源细胞外囊泡检测试剂盒。该试剂盒通过抗体识别EV表面的抗原，可以特异性地识别并定量检测不同生物样品中存在的EV。

图片 Total human EV ELISA kit工作原理示意图

本试剂盒（Total human EV ELISA kit）应用夹心酶联免疫检测（Sandwich ELISA）原理定量检测人源细胞外囊泡，用小鼠抗四重跨膜蛋白的单克隆抗体包被微孔板，形成固相抗体，向固相抗体微孔板中加入 EV标准品和待测样品，然后加入两种不同的生物素（Biotin）标记的四重跨膜蛋白小鼠单克隆抗体，最后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（SA-HRP），形成抗原-抗体‐Biotin-SA-HRP复合物，经过洗涤后加入化学发光底物；化学发光底物与过氧化氢在HRP 酶的催化下产生化学发光信号，信号的强度与样品中EV的量呈正相关。

图片：人类EV标准品制备流程图

本试剂盒性能经过充分评估，标曲范围为0.16-10 μg/mL，精密度板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%，准确度满足75%-125%范围，检测限为0.10 μg/mL。