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1.材料与方法
细胞株
人肺腺癌细胞株A549在含10%小牛血清的RPMI1640细胞培养液中培养,其内加入青霉素(100kU/L)及链霉素(0.1g/L),置于5%CO2、饱和湿度、37℃的培养箱内培养。
检测指标
采用MTT法检测不同浓度Rg3(10-4mol/L,10-5mol/L,10-6mol/L)对人肺腺癌A549细胞增生的影响、流式细胞仪观察不同浓度Rg3(3×10-7mol/L、10-6mol/L,3×10-6mol/L)对A549细胞凋亡的影响、放射免疫分析法定量检测细胞培养液中加入不同浓度Rg3(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L和10-4mol/L)后内源性VEGF含量的变化。
统计学方法
细胞增生(A值)比较采用单因素方差分析,凋亡细胞数比较采用X2检验,VEGF含量的分析采用方差分析。α=0.05。
2.结果
不同浓度Rg3对人肺腺癌A549细胞凋亡的作用
三种浓度Rg3(即3×10-7mol/L、10-6mol/L、3×10-6mol/L)作用120h后人肺腺癌A549细胞的凋亡百分数分别为18.4%、25.1%、29.8%,其中3×10-6mol/LRg3浓度组的细胞凋亡数与3×10-7Rg3浓度组和对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。
不同浓度Rg3和不同作用时间对细胞内源性VEGF的影响
由表2可见,10-5mol/L和10-4mol/L浓度Rg3组的VEGF含量明显低于对照组(P<0.05),高浓度组(10-4mol/L)的VEGF低于低浓度组(10-7mol/L和10-6mol/L),持续作用72h的VEGF含量明显低于作用48h和24h组。不同浓度Rg3作用组别之间、不同时间段之间VEGF含量变化差异有统计学意义。
3.结论
人参皂苷20(R)-Rg3可显著抑制肿瘤细胞内源性的VEGF分泌,高浓度可导致肿瘤细胞的凋亡。该研究不仅证实了Rg3对肿瘤细胞因子分泌有明确的影响,说明了Rg3对肿瘤血管生成的抑制作用机制之一是通过调节影响血管生成因子的表达而发挥作用的。
文献来源:四川大学学报(医学版)2006年第37卷第1期。
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