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细胞系:
人宫颈癌Hela细胞购自中国科学院细胞所。
检测指标:
培养人宫颈癌Hela细胞,用不同浓度Rg3(10、20、40μg/mL)进行干预,用Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪方法定量检测细胞的凋亡及细胞周期的变化,用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2/bax表达。
统计学分析:
用SPSS13.0进行统计学处理,计量资料以均数±标准差表示,采用t检验,P<0.05为差异有显著性。
Rg3诱导Hela细胞的凋亡率和细胞周期的变化
FCM检测结果显示,10、20、40μg/mLRg3处理Hela细胞48h后,各组凋亡率分别为(10.8±1.4)%、(19.3±2.7)%、(31.2±4.8)%,与对照组(3.9±0.6)%比较,差异均具有显著性(均P<0.01),且随着浓度增加,细胞凋亡的百分比随之增加。对照组的Hela细胞的G0/G1期和G2/M期细胞数分别为(59.4±8.6)%和(17.7±2.0)%;40μg/mLRg3作用48h后Hela细胞的G0/G1期和G2/M期的细胞数分别为(12.5±1.6)%和(66.4±11.7)%。Hela细胞经不同浓度Rg3作用48h后,细胞周期发生明显改变,即随着Rg3浓度的增加,G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高(P<0.01)。分析以上结果可知Rg3可将Hela细胞阻断在G2/M期增殖。见附表。
(点击图片,查看大图)
Rg3对Hela细胞Bcl-2和bax基因mRNA表达水平的影响
Rg3作用Hela细胞前后,Hela细胞中Bcl-2和bax条带的积分光密度(Bcl-2/β-actin和bax/β-actin)标化后分别为(0.72±0.34)、(0.13±0.22)、(0.22±0.12)和(0.64±0.24)。Rg3作用后细胞中的Bcl-2基因mRNA表达明显降低,而bax基因mRNA表达明显增高,2种基因表达的差异有显著性(P<0.01)。
Rg3可诱导人宫颈癌Hela细胞发生凋亡,其机制可能与下调凋亡相关基因Bcl-2的表达和上调bax基因的表达有关。
文献来源:中国现代医学杂志,2012年1月第22卷第3期。
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