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1.材料与方法
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细胞系:
人宫颈癌Hela细胞购自中国科学院细胞所。
检测指标:
培养人宫颈癌Hela细胞,不同浓度(10、20、40、80μg/ml)Rg3处理,HE染色观察细胞形态学改变,CCK-8、流式细胞仪检测细胞的凋亡。
统计学分析:
用SPSS13.0进行统计学处理,计量资料以均数±变准差表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
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2.结果
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Rg3对Hela细胞形态学的影响
处理后的细胞经HE染色后,显微镜下观察可见细胞形态变小,细胞间隙变宽,细胞核浓缩,部分细胞脱落漂浮于培养液中。高倍镜下,可见凋亡细胞膜皱缩,细胞体积缩小,染色体浓缩,核仁消失,形成大小不等的胞核内小体即凋亡小体。与对照组比较,凋亡细胞染色加深,尤其细胞膜染色更明显。
Rg3处理Hela细胞后细胞生存率
(点击图片,查看大图)
细胞周期的变化
人参皂苷Rg3处理Hela细胞48h后流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率如图2所示。随着药物浓度的增大,肿瘤细胞凋亡率不断上升,平均凋亡率分别为16.4%、37.0%、50.0%、69.8%。表明细胞凋亡率随着药物浓度的增大而增加。
(点击图片,查看大图)
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3.结论
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CCK-8测试表明,Hela细胞经过浓度梯度的Rg3作用后,生存率随着药物浓度的增大而下降,表明药物对肿瘤细胞表现出增殖抑制作用。流式细胞术检测结果显示,随Rg3浓度的提高,细胞凋亡率逐渐增加。Rg3可诱导人宫颈癌Hela细胞发生凋亡,其机制可能与细胞内凋亡相关基因的表达变化有关。
文献来源:现代肿瘤医学2012年7月第20卷第7期。
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