R-loop是真核生物内广泛存在的三链核酸结构。近年来,R-loop被证明是基因表达和基因组稳定性的调节因子,引起了越来越多的关注。R-loop的全基因组定位可以帮助科学家们对Rloop的发生和功能进行精确研究。
2024年2月嘉因生物推出Rloop CUT&Tag服务, 该服务基于CUT&Tag体系,利用S9.6抗体,在全基因组水平对R-loop进行定位,具体流程包括:磁珠结合细胞/细胞核、S9.6 抗体识别R-loop、IgG二抗孵育、PA-Tn5孵育、DNA回收与建库。
R-loop CUT&Tag实验流程
2024年10月15日,嘉因生物本着精益求精的精神,完成了Rloop CUT&Tag的实验升级,推出Rloop CUT&Tag 2.0。Rloop CUT&Tag 2.0对上海嘉因的标准CUT&Tag protocol做了专门的优化,使得1)IP反应的实际投入细胞数从原来的50万降低到20万,这对于样本量少的珍贵样本更加友好2)其次,实验的IP富集效果更强,拥有更高的实验信噪比。
案例一:HEK293T的两个20万细胞的Rloop CUT&Tag高重复性
样本Peak数
LS_20W | S_20W | |
Peak number | 56849 | 43850 |
样本peak分布情况
IGV可视化
案例二:人角质形成细胞系HaCat 10万细胞 VS 20万细胞
样本Peak数
S-10万细胞 | S-20万细胞 | |
Peak number | 14690 | 15406 |
样本peak分布情况
IGV可视化
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