1.材料与方法
细胞株:
人食管癌细胞株EC-9706,在含10%的胎牛血清的RPMI1640培养液中培养,其内加入青霉素(100Lmol/L)、链霉素(100Lmol/L),置于5%CO2饱和湿度的培养箱内培养,0.25%胰酶消化传代。
实验方法:
不同浓度中药20(R)-人参皂苷Rg3(50、100、200μmol/L)和不同时间点进行干预,采用MTT法、流式细胞术、免疫细胞化学等技术了解不同浓度Rg3对此细胞增殖、凋亡、细胞周期及内源性VEGF的影响。
统计学方法:
细胞增殖的比较采用单因素方差分析,凋亡细胞数比较采用X2检验。检验水准α=0.05。
2.结果
细胞增殖的影响
见表1。
(点击图片,查看大图)
细胞凋亡和周期
见表2。
(点击图片,查看大图)
对VEGF的影响
空白及50、100、200μmol/L浓度VEGF的表达分别为32.78±16.39、20.92±11.35、13.21±5.37、6.57±2.81,各浓度组中VEGF的表达均显著低于对照组(P均<0.01);随着Rg3浓度的增加,VEGF的表达呈降低趋势,100μmol/L和200μmol/L浓度组的表达明显低于对照组(P<0.01),且200μmol/L浓度组的表达亦显著低于50μmol/L浓度组。
3.结论
MTT法示不同浓度Rg3对人食管癌细胞株EC-9706的增殖均有明显抑制作用;流式细胞术示Rg3能诱导细胞凋亡及调节细胞周期;免疫细胞化学示Rg3能抑制细胞内源性VEGF的表达。适当浓度的Rg3作用一定时间后,可促进人食管癌细胞株EC-9706的凋亡,并可抑制肿瘤细胞内源性分泌的VEGF的表达,Rg3抑制肿瘤血管生成的机制之一是通过影响细胞分泌上述因子而起作用的。
文献来源:山东医药2009年第49卷第4期。
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