人参皂苷Rg3治疗食管癌分子机制的实验性研究

(1)利用MTT法、流式细胞术测定人参皂苷Rg3对人食道癌EC9706细胞的生长抑制作用；采用免疫组化、RT-PCR和Westen-blot等方法分析人参皂苷Rg3对细胞周期蛋白p21、p27、c-Myc、PCNA和Cyclin-Dl等表达的影响，探讨人参皂苷Rg3抑制EC9706细胞增殖的分子机制。

(2)采用AO/EB双染色和流式细胞术观察分析Rg3对EC9706细胞凋亡的影响，利用免疫组化、RT-PCR和Westen-blot等方法分析人参皂苷Rg3对细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-xL、p53、Fas和caspase-3表达的影响，探讨人参皂苷武Rg3促EC9706细胞凋亡的分子机制。

(3)采用原代培养的人挤静脉内皮细胞(HUVECs)，利用MTT、流式细胞术、Transwell小室、小管形成等方法观察Rg3对HUVECs的增殖、迁移、侵袭等方法，研究人参皂苷Rg3体外的抗血管生成作用。

(4)利用免疫细胞化学、RT-PCR、Western-blot等方法，对人参皂苷Rg3作用后EC9706食道癌细胞中血管生成相关分子MMP-2、MMP-9和VEGF的表达进行研究，探讨Rg3对食道癌新生血管抑制的作用机制。

(1)人参皂苷Rg3能够抑制食管癌细胞EC9706的增殖，主要是将食管癌细胞阻滞在G0/G1期，其分子机制可能通过上调p21蛋白表达水平，而下调c-Myc和Cyclin-Dl蛋白来实现细胞增殖抑制作用的。

(2)人参皂苷Rg3可诱导人食道癌EC9706细胞发生凋亡，凋亡率随Rg3浓度增加而增加，其机理为Rg3能上调Bax、p53和Caspase-3蛋白表达水平，而促使肿瘤细胞凋亡。

(3)Rg3能显著抑制HUVECs细胞的增殖、迁移和小管形成，表明Rg3能抑制新生血管形成，具体的作用机理有待进一步深入研究。Rg3有望成为新型的抗血管生成的中草药单体成分。

(4)人参皂苷Rg3可能通过下调食道癌细胞EC9706中VEGF和MMP-2、MMP-9的表达，从而抑制血管内皮细胞的增殖和迁移，抑制肿瘤血管生成。

文献来源：2013年郑州大学博士学位论文。