RAS(ON)多选择性抑制剂RMC-6236 胰腺癌I期结果积极

RAS“on”分子胶RMC-6236早期临床数据披露，RMC-6236单药作为胰腺癌患者的二线疗法，在KRAS G12X亚型患者和RAS任意突变患者的中位PFS（progression-free survival，无进展生存期）分别长达8.1个月和7.6个月，而过往数据中，这类患者的中位PFS仅为2.0-3.5个月^[1]，且RMC-6236具有可控的安全性以及在KRAS G12X突变肿瘤患者中有很好的耐受性^[2]。这积极的结果对胰腺癌的治疗具有重大突破。此外，该公司也将计划开展3期临床。

RAS是第一个被发现的人类肿瘤基因，该家族包含KRAS、HRAS和NRAS。RAS癌基因是癌症中突变频率最高的基因之一，其经常的驱动突变发生在密码子12，13和61^[3]。而KRAS是RAS家族中最常见的亚型，在实体瘤中KRAS也是出现突变频率最高的。癌症相关的KRAS突变常见于非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）、结直肠癌（Colorectal cancer, CRC）以及胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）（图1）。

图1 肿瘤中的RAS突变频率^[2]

目前已经有两款上市的抑制剂，分别是sotorasib (AMG510)和adagrasib (MRTX849)，两款抑制剂都是靶向KRAS G12C的非活性状态。两款抑制剂的上市也打破了KRAS不可成药的观点。然而，由于当前的药物只针对于KRAS G12C或其他单一突变体，在仅使用该抑制剂时并不能对其他突变体有很好的抑制，这也导致了耐药性的产生。因此，能够广泛抑制KRAS突变体的研究仍在继续开展^[4]。

最近，Revolution Medicines研发出了一种新的可逆三复合物RAS广谱抑制剂RMC-7977。临床前研究中已经显示RMC-7977对携带各种RAS基因型的RAS成瘾肿瘤的有效活性^[5]（图3）。

图3 RMC-7977三元复合物模型^[5]

与RMC-7977同为Pan-RAS抑制剂的RMC-6236，是一种 RAS（ON）多选择性非共价抑制剂。该抑制剂可抑制野生型变体和典型RAS亚型突变体GTP结合的活性状态。在临床前实验也证明RMC-6236对RAS突变体和野生型具有广谱抑制作用，并推动了多种肿瘤类型的消退^[6]。

该公司也开发了另一种分子胶共价抑制剂RMC-6291，相较于RMC-7977和RMC-6236的广泛抑制作用，该抑制剂主要针对于KRAS-G12C突变体。目前最高临床状态正处于临床1/2期。

图4 三种抑制剂的化学结构

与其他抑制剂不同的是，分子胶可以与KRAS结合。这是因为，这些抑制剂来源于一种天然产物sanglifehrin A，这种天然产物能与高亲和力的亲环蛋白A（cyclophilin A，CypA）结合。这些抑制剂具有独立的RAS和CypA结合基序，结合CypA后，三复合物抑制剂重塑CypA表面，从而产生了对KRAS具有高亲和力的二元复合物。由此产生的CypA-化合物-KRAS三复合物在空间阻断了KRAS-效应器之间的相互作用并破坏了下游信号的传导^[7]。目前，针对RAS突变相关的癌症药物较少，具有很大的临床缺口。因此，开发RAS (ON)多选择抑制剂具有广阔的市场前景。

图5 分子胶抑制原理示意图^[2]

爱思益普RAS-RAF disruption

筛选平台介绍

爱思益普生物化学部（IBC）打造了集蛋白纯化、酶学方法开发、抑制剂活性筛选于一体的RAS-RAF阻断的筛选平台。该平台拥有CypA，KRAS、HRAS、NRAS野生型以及KRAS 多个突变体的蛋白，并可以对其进行分子胶三复合物抑制剂的筛选，以及能够自主完成筛选的试剂盒产品，旨在满足新药研发企业对速度、效率和结果的需求，用专业的技术和高效的沟通帮助客户提高新药研发的效率。

1. 蛋白纯化

爱思益普目前已经纯化出CypA、KRAS、HRAS、NRAS野生型以及KRAS突变体等蛋白，蛋白团队拥有多年丰富的工作经验，每批蛋白都会经过活性验证，以保证纯度和活性，充分满足各种实验需求。

2. KRAS (ON)/CypA Ternary assay

分子胶具有RAS和CypA独立的结合基序，当该分子胶存在于反应中时，会形成RAS-分子胶-CypA的三元复合物，从而使得RAS和CypA之间距离减少，利用HTRF方法可以检测分子胶促进形成三元复合物的能力。

HTRF方法检测原理图

我们检测了广泛抑制剂RMC-6236、RMC-7977以及KRAS-G12C共价抑制剂RMC-6291，并且是在GTP以及GTP类似物GMP-PNP结合突变体两种状态下形成三元复合物的能力。

KRAS (ON)/CypA Ternary assay筛选

3.RAS(ON)/CypA/cRAF binding assay

文献报道RAS-分子胶-CypA三元复合物能够空间阻断RAS与RAS效应因子的结合。利用该机制，我们开发了HTRF方法。即当分子胶发挥作用时便不能检测到RAS（ON）与RAF之间的结合信号。

HTRF方法检测原理图

我们检测了三种抑制剂的RMC-6236、RMC-7977和RMC-6291抑制RAS (ON)与CRAF的结合能力，由数据可以看出RMC-6291对KRAS-G12C具有选择抑制的作用。此外，我们还检测了GTP和GMP-PNP结合KRAS突变体条件下的抑制作用，为客户提供多种选择需求。

RAS(ON)/CypA/cRAF binding assay筛选

4.SPR方法检测分子胶与CypA的结合

IBC生物物理团队可以提供分子胶与CypA以及分子胶与KRAS突变体结合的SPR评价方法。

RMC-6236与CypA 结合SPR评价

小结

爱思益普团队不仅可以提供RAS (ON)::CypA三元复合物和RAS (ON)::CypA::RBD抑制的生物评价体系，同时可提供上述涉及到的蛋白产品以及自主完成该反应的试剂盒，满足客户的多种需求。此外，爱思益普团队具有丰富的细胞、DMPK等研究经验，致力于在生化、ADME、PK/PD、体内药理学等生物学领域为客户提供一体化的服务。

参考文献

[1]https://ir.revmed.com/static-files/eeeb0690-0ef4-44b8-b5fe-8d11d8df3c9a.

[2]Alexander I Spira, Alexander N Starodub, et al. Abstract PR010: Preliminary safety and pharmacokinetic profiles of RMC-6236, a first-in-class, RAS-selective, tri-complex RASMULTI(ON) inhibitor in patients with KRAS mutant solid tumors on the Phase 1 trial RMC-6236-001. Mol Cancer Ther 1 December 2023; 22 (12_Supplement): PR010. https://doi.org/10.1158/1535-7163.TARG-23-PR010.

[3]Simanshu DK, Nissley DV, McCormick F. RAS proteins and their regulators in human disease. Cell. 2017;170:17–33. doi: 10.1016/j.cell.2017.06.009.

[4]https://www.revmed.com/wp-content/uploads/2023/10/RMC-6236-a-Novel-First-in-Class-Tri-complex-RASMULTION-Inhibitor.pdf

[5]Kim, Dongsung et al. “Pan-KRAS inhibitor disables oncogenic signalling and tumour growth.” Nature vol. 619,7968 (2023): 160-166. doi:10.1038/s41586-023-06123-3.

[6]Holderfield M, Lee BJ, Jiang J, et al. Concurrent inhibition of oncogenic and wild-type RAS-GTP for cancer therapy. Nature. 2024;629(8013):919-926. doi:10.1038/s41586-024-07205-6.

[7]Jiang J, Jiang L, Maldonato BJ, et al. Translational and Therapeutic Evaluation of RAS-GTP Inhibition by RMC-6236 in RAS-Driven Cancers. Cancer Discov. 2024;14(6):994-1017. doi:10.1158/2159-8290.CD-24-0027

公司介绍

北京爱思益普生物科技股份有限公司 2010年创建，致力于打造靶点驱动的药物发现生物学平台。作为创新型CRO+的探索者，爱思益普专注于以“新靶点、新方法、新技术”解决创新药从靶点发现到候选化合物确认阶段的生物学和成药性的挑战；同时，爱思益普融合临床医学和生物学的专业团队，基于对疾病生物学及药物研发逻辑的深入理解，建立药物发现“一体化”的生物学平台为客户提供综合解决方案。爱思益普关注新药研发企业对质量、效率和成本的需求，用专业的生物学技术和高效的沟通帮助客户提高新药研发的效率及成功率。

爱思益普建立的技术平台包括：

1、基于靶点的药物筛选平台：建立了超过1500种药物靶点，涵盖大多数离子通道，GPCR，激酶和非激酶靶点以及近万个实验方法，建立了从生物物理学、生物化学、细胞生物学、电生理学平台以及各种多平台和高通量筛选技术。

2、体外和体内药效筛选评价平台：包括肿瘤、免疫、心血管、中枢神经系统、代谢基于细胞、组织或动物模型的药效学评价。

3、早期成药性筛选评价平台：包括药物发现阶段ADME和PK研究，以及药物脱靶效应筛选（hERG，safety panel，激酶谱等）

4、新分子平台：专注于ADC、多肽、蛋白降解、小核酸、细胞治疗等多种新分子的药物发现研究。