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本文是由吉林大学第二临床学院李博等人开展的,人参皂苷Rg3对乳腺癌细胞(MCF-7)表达金属蛋白酶2、9(MMP-2,MMP-9)的影响研究。研究表明人参皂苷Rg3能够抑制w-1990细胞体外血管生成拟态的形成,其机制可能与人参皂苷Rg3能抑制基质金属蛋白酶MMP-2,MMP-9的分泌有关。MMP-2(CA4001)和免疫组化试剂盒,人参皂苷Rg3纯品。
MMP2、MMP9免疫组化细胞表达分析,细胞培养在放有窄条盖玻片的六孔板中,用浓度40ugml Rg3处理细胞,对照组为不含Rg3的RPMI全培养基。第二天收获细胞,细胞用PBS洗涤三次,80%的冷丙酮固定10 min后,按照sp法进行DAB染色,苏木素复染,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,最后在Olympus多功能显微镜下观察。MMP-2、MMP-9表达以细胞膜或细胞浆出现棕黄色为阳性细胞信号。计算机自动扫描系统进行定量分析。
DAB染色阳性结果为将抗体表达阳性的细胞染成黄色,利用细胞免疫化学技术观察到随着人参皂苷Rg3用药浓度的增高,MMP-2、MMP-9的免疫组化阳性染色结果在MCF-7乳腺癌细胞中表达亦呈现减少趋势。结果下图所示,与对照组相比,应用人参皂苷Rg3组MMP-2、MMP-9表达明显减少,不用人参皂苷Rg3组MMP-2、MMP-9的表达无变化。说明人参皂苷Rg3对MMP-2、MMP-9表达具有抑制作用,下图为MMP-2、MMP-9表达阳性的乳腺癌细胞。
本实验表明人参皂苷Rg3能够剂量依赖性的降低乳腺癌MCF-7细胞表面MMP-2、MMP-9的表达,并且降低这两种金属蛋白酶的分泌,人参皂苷Rg3能显著抑制MCF-7细胞分泌IV型胶原酶,同时可使其侵袭能力显著降低。
本文文献来源:李博,于庭,徐继杰.人参皂苷Rg3对乳腺癌细胞(MCF-7)表达金属蛋白酶2、9(MMP-2,MMP-9)的影响[J].中国实验诊断学,2005,9(4).
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