CGT：当“HCD片段大小分布”遇见“毛细管凝胶电泳”

宿主细胞DNA（HCD）残留是指可能出现于生物制品中的来自宿主细胞的DNA片段。生物制品（例如疫苗、抗体药物、基因药物等）多使用传代细胞株进行生产，严格的纯化工艺可以去除一部分宿主细胞的DNA片段，但产品中仍有可能会有残留杂质，这些宿主细胞残留DNA可能会传递肿瘤或病毒相关基因，存在潜在的危险性，故HCD检测项目是生物制品生产工艺中重要的质量检测指标之一。

残留的宿主DNA是生产中产生的杂质，其存在潜在的致瘤性、传染性和免疫原性等风险。相关研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能会有一定的致病性，而且残留DNA片段越大，生物制品的风险等级越高。因此，各国监管机构对其提出了严格要求。美国食品药品监督管理局（FDA）关于人类基因治疗新产品生产指导文件中明确指出HCD的片段要小于200bp；2022年5月，国家药品监督管理局药品评审中心（CDE）发布的体内基因治疗产品要学研究与评价技术指导原则（试行）中也明确指出需对DNA残留量和残留片段大小进行控制，建议尽量将DNA残留片段的大小控制在200bp以下。因此建立严格可靠的HCD的片段大小分布情况检测方法有助于监测生产工艺，确保生物制品的安全性和质量。

毛细管凝胶电泳法（CGE-LIF）是根据片段大小的差异进行分离，核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团，呈负离子化状态，加反向电压时，在电泳过程中从负极向正极移动；带电荷的核酸通过凝胶向正极迁移，迁移速率受到核酸的分子大小、构象、凝胶浓度、电场等因素影响。在相同的电泳条件下，不同大小、构象的核酸片段逐一到达检测窗口，从而达到分离和检测的目的。

毛细管凝胶电泳法具有以下特点：

基于毛细管凝胶电泳法的优势，宜明细胞建立了毛细管凝胶电泳法检测HCD片段大小分布、质粒纯度、AAV载体衣壳蛋白等分析平台，助力基因与细胞治疗企业质量控制和产品放行。

由图片可以看出，样品出峰时间早于200bp Marker的出峰时间，样品外源DNA残留片段小于200bp。

宜明细胞作为国内细胞与基因治疗领域病毒载体CDMO服务的先行者，为CGT药物研发企业提供菌种库构建、工艺开发、方法学开发、临床样品及商业化生产等全流程服务，并建立了严格且完备的质量控制平台。宜明细胞通过自身优势，不断优化和健全检测方法和检测平台，为基因治疗新药上市保驾护航！

宜明细胞自成立以来布局全球AAV基因治疗与细胞治疗研发，并逐步形成和提升了从大规模质粒、AAV等载体制备，到质量的监控检测（包括空壳率、病毒感染滴度、宿主蛋白、病毒颗粒的聚集度等），再到工艺流程研发及优化、配方开发等一整套平台工艺，今年三月交付使用的苏州基地则进一步扩大了宜明细胞高品质CDMO平台的能力和规模。

宜明细胞在北美（加拿大温哥华、美国马里兰）建有研发中心，在苏州及济南建有面积超过10000平米的GMP厂房，采用绝对A级隔离器灌装，并邀请了知名专家进行GMP体系建设，按照法规要求建有独立的质粒生产平台、病毒包装平台、细胞培养平台、细胞库平台等，并拥有涵盖生化、微生物、化学的质量检测平台。目前可向细胞及基因治疗企业提供GMP级别的AAV、质粒、慢病毒、腺病毒、CAR-T等病毒载体与基因药物开发、制备服务，并配套提供产品工艺开发方案、GMP体系平移等服务，全方位为细胞和基因治疗领域客户提供一站式CDMO整体解决方案，以协助客户加速基因细胞药物在中美欧等国的研发、临床试验和上市。