RNA Pulldown实验，是一项用于筛选与靶RNA结合的蛋白质的定性实验。通过体外转录法或合成生物素标记RNA探针，与细胞裂解液孵育，形成生物素-RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素磁珠结合，从而将靶RNA结合的蛋白从细胞裂解液中分离出来。洗脱后的复合物，可以通过Western Blot实验，检测靶RNA是否与已知的蛋白结合，还可以通过银染-质谱法，高通量筛选与靶RNA结合的众多未知蛋白。
RNA Pulldown实验操作步骤较为复杂，需要丰富的技术经验，在实验的过程中，需要根据不同情况优化实验方案，摸索最适的实验条件，才能得到可靠的实验结果。对于刚开始接触RNA Pulldown实验的老师，可能会对实验产生疑惑，为了便于大家理解实验原理和操作步骤，我们整理了RNA Pulldown实验的大致流程，如图1所示：
图1 RNA Pulldown实验流程图
另外，如果通过RNA Pulldown实验筛选得到了与靶RNA结合的蛋白，需要反向验证该蛋白是否可以将靶RNA拉下来，可以通过RNA免疫沉淀（RIP）实验进行验证，正反向同时验证，可以充分说明RNA与蛋白的结合关系。
吉玛基因提供经验丰富的RNA Pulldown实验和RIP实验服务项目，为初入实验室的您，解决实验操作难的困扰。如果您的课题研究涉及该两项实验，欢迎垂询！
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