尽管单颗粒冷冻电子显微镜技术(SPA)已经非常成熟,可以得到许多纯化获得的重要蛋白质复合物的高分辨率三维结构,而冷冻制样依然是SPA的最大瓶颈问题,其中冷冻制样导致的取向优势问题是最为常见的也是非常难以解决的关键问题之一。 重构过程需要来自各个方向的蛋白质投影,以覆盖整个倒易空间。 然而,吸附在气液界面(AWI)上的蛋白质表现出取向优势,这导致投影数据集不完整,即在傅里叶空间中存在缺失分量,此时蛋白质密度会发生不同程度的畸变,导致重构失真。
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