耐高温T7 RNA 聚合酶仅凭一步IVT反应高效合成circRNA
在基于 T4 噬菌体胸苷酸合成酶基因或者鱼腥藻 pre-tRNA 的 I 型内含子 PIE 环化策略 中,exoGTP (外源添加) 中游离-3'OH 率先攻击位于 E1-5' Intron halfs 之间的 5'自剪接位点,使得 E1 末端核苷酸 (U) 暴露出-3'OH,进而攻击位于 3'' Intron halfs (ωG) -E2 之间的 3'自剪接位点,发生两次连续的转酯反应,E2/E1 末端核苷酸共价连接,形成封闭环状结构。 所谓 一步法 共环化 , 指的是在体外转录反应体系中,由于存在 GTP 和 Mg2+ ,因此,从线性化模板转录形成的 precusor RNA 会紧接着发生环化反应,从而使得 IVT 反应产物中存在一定比例的 circRNA。 测定不同温度下野生型 (WT) T7 RNA Polymerase 的催化活性。
生物制品圈
mRNA肺癌疫苗的幕后英雄:T7 RNA聚合酶
8 月 24 日消息,全球首款mRNA肺癌疫苗——由拜恩泰科(BioNTech)公司开发的BNT116正式在全球7个国家和地区启动临床试验,这标志着人类在癌症治疗策略上的又一重大进步。 根据世界影响因子最高的学术期刊《CA: A Cancer Journal for Clinicians 》发布的2020年全球癌症负担数据,肺癌是全球癌症死亡的主要原因,在185个国家和地区中是男性死亡病例排名第一的癌症,在89个国家中占据首位。 随着生物技术的飞速发展,mRNA疫苗作为一种新型的生物制剂,在疾病预防和治疗中展现出巨大的潜力。
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