重现“消失的CD38”，Cytognos®CD38-multi-epitope-FITC获第一类医疗器械备案批准！

多发性骨髓瘤（MM）是一种克隆浆细胞异常增殖的恶性疾病，浆细胞表面高表达CD38分子，这也让CD38成为治疗MM的热门靶点。近年来，靶向CD38的单克隆抗体异军突起，以其单药治疗和联合用药方案在新诊断MM患者的一线诱导和复发或难治性MM患者中的治疗优势占据重要地位。靶向CD38的单克隆抗体如达雷妥尤单抗（Daratumumab）和艾沙妥昔单抗（Isatuximab）已被批准用于治疗MM，但此类药物会干扰浆细胞表面CD38的流式检测，导致假阴性结果¹。为了解决这一问题，Cytognos开发出CD38抗体试剂（流式细胞仪法-FITC）CD38-multi-epitope-FITC，该试剂于8月13日获得中国国家药品监督管理局第一类医疗器械备案批准（代理人碧迪医疗器械（上海）有限公司）。

CD38单克隆抗体靶向治疗是

理想的MM治疗策略之一

MM的特征在于骨髓中恶性浆细胞增殖，在血液系统恶性疾病中发病率高居第二位，具有高度异质性，目前仍无法治愈，大多数患者会复发，预后较差，迫切需要新的治疗方法。近年来，研究者开发出免疫调节药物、蛋白酶体抑制剂、单克隆抗体药物等新型疗法，CD38单克隆抗体靶向治疗是其中的理想选择之一。CD38是一种具有外酶功能的糖蛋白，在骨髓瘤细胞表面的表达量非常高且均匀，而在正常淋巴细胞、髓系细胞和非造血组织细胞上的表达量则相对较低，因此，CD38分子成为MM新型治疗策略的理想靶点²。针对抗CD38单克隆抗体的开发始于1990年，目前已获批用于治疗MM的药物达雷妥尤单抗（Daratumumab）和艾沙妥昔单抗（Isatuximab）可与MM细胞表面的CD38结合，通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）、补体依赖的细胞毒作用（CDC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP）等多种免疫相关机制诱导肿瘤细胞凋亡（图1）²。

图1 抗CD38单克隆抗体对MM细胞的作用机制示意图

“消失的CD38”：

流式检测MRD面临新的挑战

CD38单抗药物治疗极大地提高了MM患者的生存，但同时也给基于流式细胞术的微小残留病（MRD）检测造成了新的挑战。MRD是MM等恶性血液病临床疗效判断和预后分层的重要依据。由于CD38在浆细胞表面高表达，可以有效区分浆细胞与其他细胞，因此MM等浆细胞疾病在使用流式细胞术进行MRD检测时，抗体组合中都推荐选择CD38和CD138作为浆细胞的骨架标志物。然而，CD38单抗药物治疗可遮蔽浆细胞表面CD38，使得使用抗CD38抗体无法对浆细胞进行常规检测，从而影响流式检测MRD的准确性。

研究显示，接受达雷妥尤单抗治疗的患者，浆细胞表面的CD38流式检测将会受到干扰，即浆细胞表面的CD38位点被达雷妥尤单抗药物竞争性结合形成遮蔽作用，导致常规的CD38流式抗体无法与浆细胞结合，浆细胞信号缺失，并且达雷妥尤单抗药物对流式检测CD38的干扰可能在停药后依然持续4~6个月^1,3。这也是CD38单抗药物治疗后，MRD阴性的主要原因之一。如何解决接受CD38单抗药物治疗患者MRD检测的局限性成为了临床检测的一个关键问题。

突破MRD检测壁垒：

多表位CD38抗体试剂重现“消失的CD38”

为了解决这一问题，Cytognos研发出“CD38抗体试剂（流式细胞仪法-FITC），CD38-multi-epitope-FITC”（图2）⁴。

图2 多表位CD38抗体的结合原理

在EuroFlow开发的二代流式检测技术（NGF）中，将原先的CD38-FITC单克隆抗体替换为多表位CD38抗体，使MRD检测不受CD38单抗治疗的干扰。J Flores-Montero等在接受CD38单抗治疗后的MM骨髓样本中使用EuroFlow NGF-MRD检测方案评估了4个不同FITC偶联CD38抗体克隆的性能，结果显示，无论是在达雷妥尤单抗还是在艾沙妥昔单抗治疗下，多表位CD38抗体试剂区分骨髓瘤细胞的性能最佳（图3）⁵。Annemiek Broijl等研究观察到相似的结果，发现在接受达雷妥尤单抗治疗的MM患者中，多表位CD38抗体能可靠地检测MM患者的MRD⁶。这些研究表明，多表位CD38抗体不会被CD38单抗药物干扰，从而降低MRD漏检风险，助力CD38单抗药物治疗。

图3 在CD38单抗治疗后的两份MM骨髓样本中评估4个不同FITC偶联CD38抗体克隆的性能

上图显示了接受达雷妥尤单抗治疗患者的MM MRD样本中4个不同克隆的染色模式，下图则是诊断时使用艾沙妥昔单抗体外培养的MGUS骨髓样本

Cytognos MM MRD抗体组合

双剑合璧，梦幻联合

2022年年初，碧迪医疗为拓宽流式应用，加速流式行业标准化进程，对Cytognos公司进行了收购，这标志着Cytognos旗下所有新一代标准化流式解决方案将全面引入中国。与此同时，碧迪医疗着眼流式标准化，借鉴EuroFlow™ 经验，基于新一代“标准化流式”技术要求，打造符合中国患者需求的标准化流式体系，使流式结果只受限于生物学改变而非技术差异！

参考文献

1. Oberle A, Brandt A, Alawi M, et al. Long-term CD38 saturation by daratumumab interferes with diagnostic myeloma cell detection[J]. Haematologica, 2017,102(9):e368-e370.

2. Morandi F, Horenstein AL, Costa F, et al. CD38: A Target for Immunotherapeutic Approaches in Multiple Myeloma[J]. Front Immunol. 2018,9:2722.

3. Courville EL, Yohe S, Shivers P, et al. VS38 Identifies Myeloma Cells With Dim CD38 Expression and Plasma Cells Following Daratumumab Therapy, Which Interferes With CD38 Detection for 4 to 6 Months[J]. Am J Clin Pathol. 2020,153(2):221-228.

4. https://www.cytognos.com/products/cyt-38f2/.

5. Flores-Montero J, Sanoja-Flores L, et al. Next Generation Flow for highly sensitive and standardized detection of minimal residual disease in multiple myeloma[J]. Leukemia. 2017,31(10):2094-2103.

6. Broijl A, de Jong ACM, van Duin M, et al. VS38c and CD38-Multiepitope Antibodies Provide Highly Comparable Minimal Residual Disease Data in Patients With Multiple Myeloma[J]. Am J Clin Pathol. 2022,157(4):494-497.