浅析原料药粒度分析方法开发思路（湿法篇）

原料药

药事纵横

2022/09/28

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湿法测定：系指选择适宜的分散方法使供试品分散成稳定的混悬液，通常可采用物理分散方法如超声、搅拌等，通过调节超声频率、时间和搅拌速度，必要时可加入适量的化学分散剂或表面活性剂，使分散体系成稳定状态，均匀稳定的通过检测窗口，以得到准确测定结果[1]。

混悬液体取样要求：样品容器应能密闭、方便超声或二次取样等，常用的配制容器如西林瓶、容量瓶等。二次取样的取样器要求较准确可用移液管或移液枪,一般也可用滴管，对于混悬液体样品，在取样过程中必须保证样品的均一性，可一边搅拌一边取样，防止大颗粒聚集在容器底部。

光学参数要求：颗粒大小和散射光强之间的关系常用米氏理论阐述，应用米氏理论常需要引入三个光学参数，分别是分散介质的折射率，样品物质的折射率，样品物质的吸收率，其中样品物质的折射率及吸收率与干法测定的要求相同，绝大多数原料都可以通过查找资料获得数据，必要时可进行考察，湿法测定值得注意的是分散介质的折射率，分散介质往往不是一种纯物质，必要时可加入适量化学分散剂或表面活性剂，折射率可采用主要背景介质的折射率，必要时可进行考察。

残差：与干法测定（《浅析原料药粒度分析方法开发思路（干法篇）》）相同，湿法测定的数据拟合同样用残差值来判断。残差可以帮助评估参数拟合的情况，即实际测量结果与理论计算是否一致。数据拟合一般被应用作判断光学参数是否合适的依据，但最好的数据拟合并不总是意味着正确的测量结果。

残差是理论光强数据与实际测量所得光强数据的最小二乘拟合差值，通常小的残差意味着测量结果准确可靠。在粒度分布正确的前提下，残差越低越好。

分散介质的要求：选择原料在其中能几乎不溶且充分分散的溶剂，或者采用原料药的饱和溶液作分散介质，可以保证原料药均匀分散。根据物料的溶解度，加入过量的待测物，保证溶液达到饱和，同时应保证溶液的制备和测定过程温度的基本一致，避免产生过饱和溶液。样品加入分散介质后，观察原料颗粒间是否聚集，是否吸附，必要时可以加入表面活性剂如卵磷脂、十二烷基硫酸钠等。

分散方法的要求：通常可采用物理分散方法如超声、搅拌等，使聚集颗粒可以充分分散。值得注意的是，超声可以使聚集的颗粒分散开，但是也可以使原始颗粒破裂，使粒径测定结果偏小，因此需考察是否需要超声，并考察超声时间和超声频率，通过测定结果判定并选择能充分分散原料的超声时间与频率。

背景测定：数据就是由被测量样品生成的散射光强，质量好的数据需要洁净、稳定的背景，在数据图上直观的显示就是散射光强随着检测器序号的增加递减，在第一号检测器的光强不超过100，背景随时间波动较小，随着检测器序号的增加，散射光强逐渐递减。

样品量：样品量通过加入样品后的遮光度变化来反映，与加入分散样品的体积和浓度有关。①如果样品颗粒较精细，较低的遮光度更合适，大约5-10%的遮光度就可以有很好的信噪比；②若样品的颗粒较粗，遮光度可以适当提高到5-12%；③若样品颗粒粒径分布较广，为了实现正确取样，15-20%较合适；④遮光度过高可能会导致多重散射。

湿法测定案例：

某原料B，可选择湿法进行粒度测定，湿法测定的前提是有合适的分散介质对其进行分散，分散介质是保证分散均匀的关键，在选择适宜的分散介质后对超声时间进行考察。通常选择能稳定分散样品的超声时间与超声频率搭配，频率不宜过高或过低，固定一个合适的频率，对超声时间的考察：根据物料的性质，观察物料在分散介质中随超声时间的变化状态，超声考察的时间从几秒到几分钟不等。