人参皂苷Rg3联合三氧化二砷抑制乳腺癌移植瘤生长及其新生血管形成的研究

人乳腺癌细胞株MCF-7应用RPMI-1640培养液(含10%胎牛血清)，置于5%CO₂、37℃的细胞培养箱中培养，每2～3d传代1次，经过几次传代后，部分细胞冻存，部分继续扩大培养，取对数生长期细胞用于造模。

取对数生长期细胞，用消化液(0.25%胰蛋白酶)消化细胞，用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液轻轻吹打制成细胞悬液，800r/min离心5min，弃上清。用不含血清的RPMI-1640液洗涤两次，计数活细胞数，将细胞悬浮于PBS中，调整细胞密度。在裸鼠右前肢腋窝皮下种植0.1ml，含107个细胞。选取皮下移植瘤约100～300mm³的裸鼠28只随机分成4组：联合用药组；Rg3组；三氧化二砷组及对照组。

完整取出瘤块并测量瘤重。按以下公式计算肿瘤抑制率：肿瘤抑制率(%)=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%；免疫组化检测微血管密度(MVD)。

实验数据应用SPSS 13.0软件进行统计学分析。计量资料采用均数±标准差(`x±s)表示，首先采用方差分析，再用SNK检验进行组间多重比较。检验水准为P<0.05为差异有统计学意义。

治疗方案结束时，除三氧化二砷组有1只裸鼠死亡外，其它组均未出现死亡。经解剖证实，无腹腔注射损伤，考虑肿瘤本身恶化或药物毒副反应所致。观察裸鼠精神状态、活动状况、应激反应、体重下降幅度、食欲和大小便等6项，作为药物毒副反应及裸鼠生存质量的评价指标。结果发现：Rg3组裸鼠生存质量最好，联合用药组次之，再次为对照组。三氧化二砷组药物毒副反应最重，生存质量最差。与三氧化二砷组相比，联合用药组药物毒副反应明显降低，生存质量明显提高。

结果见表1。各组种植瘤均明显生长，且对照组肿瘤明显大于Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组，差异有统计学意义(P<0.05)。Rg3组平均瘤重大于三氧化二砷组，三氧化二砷组平均瘤重大于联合用药组，差异均有统计学意义(P<o.05)。抑瘤率联合用药组大于三氧化二砷组和rg3组(p<0.05)；三氧化二砷组大于rg3组(p<0.05)。< span="">

结果见表2。免疫组化结果显示：Rg3组、联合用药组及三氧化二砷组MVD值均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。Rg3组MVD值低于三氧化二砷组，差异有统计学意义(P<0.05)，联合用药组MVD值低于三氧化二砷组(P<0.05)和Rg3组(P>0.05)。对照组瘤组织内新生血管最多，且形态不规则，分布不均匀，多集中在肿瘤边缘。Rg3组仅肿瘤组织间质可见少量新生血管。

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本实验通过人乳腺癌裸鼠移植瘤模型体内研究，提示人参皂苷Rg3与三氧化二砷联合治疗具有明显的协同作用，能增强抑制肿瘤组织新生血管的形成，提高抗瘤效果，同时降低三氧化二砷的毒副反应，提高生存质量。