人参皂苷Rg3诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的实验研究

MCF-7细胞贴壁培养于含10%胎牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的DMEM培养液中，置37℃、5%CO₂的饱和湿度培养箱中培养。

MTT法检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖活力；荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化；流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡；琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。

所有的数据用SPSS11.5统计软件进行分析，生长抑制率与药物浓度的关系用直线回归与相关分析，其余的值用t检验，α=0.05为检验水准。

用高浓度的Rg3处理细胞产生明显的细胞毒性作用，最终导致细胞死亡。当Rg3的浓度在37.5μg/ml~600μg/ml之间时，细胞增殖被抑制，以Rg3不同浓度和肿瘤细胞生长抑制率作直线回归和相关分析，相关系数(r)=0.953，P=0.003，Rg3处理细胞48h的IC50为71.91μg/ml(表1)。

荧光显微镜下观察150μg/mlRg3处理后的MCF-7细胞48h后，可见典型的凋亡细胞形态，即染色质凝集、核片段化、凋亡小体、核内可见致密的颗粒状荧光。而对照组细胞核呈弥漫均匀荧光，且荧光较弱(图1)

流式细胞术检测表明Rg3能诱导细胞凋亡及调节细胞周期，用150μg/ml的Rg3处理细胞48h后，S期和G2-M期的细胞比率增加，G0-G1的细胞比率下降。细胞凋亡率从对照组的(0.45±0.25)%上升到(34.86±4.65)%(表2)。

Rg3处理细胞24h和48h后，提取细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳，检测到细胞发生凋亡时由于DNA有规律的降解而出现典型的DNA梯形条带。随着药物作用时间的延长所形成的DNA梯形条带越亮，表明细胞凋亡程度越大（图3）。

本实验结果表明Rg3对MCF-7细胞有显著的诱导凋亡作用。结果显示，Rg3因能显著地抑制细胞增殖，调节细胞周期和诱导凋亡以及引起细胞形态的改变，这个研究对于Rg3应用于临床的肿瘤包括乳腺癌的化疗提供了有价值的实验依据。