Ä文献｜一种新型抗CD47抗体在肿瘤治疗中的潜力

CD47 实体瘤肿瘤治疗

Cytiva思拓凡

09/29

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CD47

CD47广泛表达于多种血液瘤和实体瘤上，巨噬细胞上SIRPα与CD47结合后，会产生“别吃我”信号，从而阻止巨噬细胞对肿瘤的吞噬作用，因此，CD47是近年免疫肿瘤学领域明星靶点。

靶向CD47不但能激活机体天然的免疫能力，还能激活机体的适应性免疫能力，这看起来是一举两得，事半功倍。然而，靶向CD47有一个不容忽视的安全隐患：正常细胞，如红细胞 (RBC) 也可以表达CD47，如果药物与RBC上CD47结合，就可能导致严重的血液毒性。因此开发CD47靶向药物的重要前提是-如何减毒增效。

一种新型抗CD47抗体和制备

近期，一项发表在《Journal of Translational Medicine》上的研究揭示了GenSci059，一种新型抗CD47抗体，在肿瘤治疗中的显著潜力和良好的安全性。GenSci059是一种针对人类CD47的人源化单克隆抗体（图1）。该抗体通过免疫小鼠获得，经过人源化改造后在293E细胞进行表达，表达上清液经0.22 μm滤膜过滤，然后通过MabSelect SuRe亲和层析柱，并使用ÄKTA蛋白层析系统进行纯化。GenSci059属于IgG4/κ亚型，由两条重链和两条轻链组成。每条重链包含443个氨基酸，而每条轻链则包含219个氨基酸，每条重链上都有一个糖基化位点 (Asn294) 。

图1：GenSci059人源化单克隆抗体结构

新型抗CD47抗体在肿瘤治疗中的潜力

值得注意的是，GenSci059在安全性方面表现出色。对照抗体 Hu5F9-G4在所有四种血型中均显示出与人红细胞 (hRBCs) 的高结合率，且这种结合率随着浓度的增加而增加，不受血型的影响。相比之下，GenSci059与人红细胞的结合非常微弱，仅在高浓度下才表现出微弱的结合（图2A）。不仅如此，GenSci059与外周血单个核细胞 (PBMC) 和血小板 (PLT) 的结合均弱于Hu5F9-G4（图2B、C）。研究中进一步评估GenSci059的抗体介导的细胞毒性，结果显示，阳性对照抗体Rituxan对Daudi靶细胞呈现出正常的剂量-反应曲线，而 GenSci059在所观察的浓度下均未表现出细胞介导的细胞毒性 (ADCC) 和补体依赖的细胞毒性 (CDC)（图2D）。

图2：GenSci059的安全性评估结果。A. GenSci059与不同血型红细胞的结合试验结果；B. 四种浓度的；C. GenSci059与人血小板结合；D. GenSci059的ADCC和CDC效应

为了探究GenSci059与红细胞结合活性低下的机制，研究人员利用抗体蛋白模拟对接来确定GenSci059与CD47的结合模式，结果显示，位于GenSci059结合表位的CD47 N-端焦谷氨酸起到了关键作用（图3A）。ELISA实验和FACS分析结果表明CD47 N-端焦谷氨酸的环化及其空间构象对GenSci059的结合至关重要（图3B、C）。此外，CD47的空间构象也影响其与GenSci059的结合，GenSci059能够正常结合未变性的CD47，但不能结合变性的CD47（经热变性和糖苷酶水解处理）（图3D）。相比之下，对照抗体Hu5F9-G4对变性和未变性的CD47均表现出正常的结合，这解释了GenSci059增强的抗体特异性和改善的安全性。

图3：GenSci059与CD47的独特结合模式。A. GenSci059与CD47结合的蛋白质对接分析；B. N端焦谷氨酸环化对GenSci059与CD47结合的影响；C. 焦谷氨酸环化酶抑制剂削弱了GenSci059与细胞的结合；D. CD47空间构象和结合表位的糖基化修饰对GenSci059与CD47结合的影响

在动物实验中，GenSci059在多种肿瘤模型（如非霍奇金淋巴瘤、急性髓系白血病和小细胞肺癌）中均表现出显著的抗肿瘤活性。重要的是，GenSci059在给药期间耐受性良好，且未表现出显著的毒性。特别是在与利妥昔单抗 (Rituximab) 联合使用时，GenSci059能够显著抑制肿瘤生长，甚至实现肿瘤完全消退。此外，研究团队还通过毒性研究评估了GenSci059在非人灵长类动物食蟹猴中的安全性。结果显示，GenSci059的最大耐受剂量 (MTD) 高达450 mg/kg，且在单次和多次给药后均未观察到明显的毒性反应。

GenSci059作为一种新型抗CD47抗体，在肿瘤治疗中展现出了强大的抗肿瘤活性和良好的安全性。随着进一步的临床研究和验证，GenSci059有望成为治疗多种血液系统恶性肿瘤的重要药物。

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参考文献：

[1] Gentulizumab, a novel anti-CD47 antibody with potent antitumor activity and demonstrates a favorable safety profile, Journal of Translational Medicine, 2024