肿瘤研究的实验利器OVA，你值得了解

如何检测OVA特异性T细胞？

我们都知道T细胞介导的免疫应答是抗原提呈细胞（antigen presenting cell，APC）和T细胞通过主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）和T细胞受体（T cell receptor，TCR）相互作用的结果。MHC分子将抗原肽提呈给能够识别该抗原肽的抗原特异性T细胞。基于这一原理，我们可以通过MHC-多肽的复合物找到靶向该多肽抗原表位的抗原特异性T细胞。

免疫检查点抑制（ICI）疗法治疗肿瘤受到广泛关注，但是其疗效依旧有限。Saddawi-Konefka R等人建立了表达OVA抗原的模型肿瘤细胞[2]，再通过H-2Kb OVA 257-264 (SIINFEKL)四聚体检测治疗组和对照组的特异性抗原CD8 T在肿瘤组织中的浸润情况。结果

发现治疗组的特异性抗原CD8 T数量比对照组减少了大约5倍（下图）。

流式方法检测OVA-H-2Kb四聚体（抗原特异性CD8+T细胞）

四聚体技术可以用于筛选和评估能够诱导强烈肿瘤特异性T细胞反应的疫苗候选物。通过检测与OVA 257-264 (SIINFEKL) 四聚体结合的T细胞作为阳性对照，研究人员可以评估疫苗诱导的免疫反应。

四聚体技术可以用于检测和定量能够识别特定MHC-抗原肽复合物的CD8+ T细胞，这些细胞在肿瘤免疫中起到直接杀伤肿瘤细胞的作用。通过使用OVA 257-264 (SIINFEKL) 四聚体，可以检测到具有杀伤肿瘤细胞能力的CTL。

四聚体技术常与流式细胞术结合使用，通过流式细胞仪可以快速、准确地分析T细胞表型和功能，这对于研究肿瘤特异性T细胞的特性和状态至关重要。此外，还可以结合磁性分选系统富集/分选抗原特异性CD8+T细胞。

四聚体技术在临床上的应用包括从患者血液中纯化特定肿瘤抗原特异性的T细胞，以及在组织移植患者过继移植治疗法中的应用。例如，Cobbold等结合磁珠法使用HLA I四聚体染色技术，从干细胞移植患者血液中纯化得到了巨噬细胞病毒(CMV)特异性CTLs，并在组织移植患者过继移植治疗法中得到应用。

[1]https://baike.baidu.com/reference/60268500/533aYdO6cr3_z3kATPTazvmhYC_BM9-quLGGW-RzzqIPmGapB5nyTcYg48Q9sPh1E0TYpIp3Y8IAhO3lCzQjnw

[2]Saddawi-Konefka R, O'Farrell A, Faraji F, Clubb L, Allevato MM, Jensen SM, Yung BS, Wang Z, Wu VH, Anang NA, Msari RA, Schokrpur S, Pietryga IF, Molinolo AA, Mesirov JP, Simon AB, Fox BA, Bui JD, Sharabi A, Cohen EEW, Califano JA, Gutkind JS. Lymphatic-preserving treatment sequencing with immune checkpoint inhibition unleashes cDC1-dependent antitumor immunity in HNSCC. Nat Commun. 2022 Jul 25;13(1):4298. doi: 10.1038/s41467-022-31941-w. PMID: 35879302; PMCID: PMC9314425.