先导科普荟 | 肾纤维化小鼠模型助力肾脏疾病研究

急性肾损伤肾纤维化小鼠肾脏疾病

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07/29

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肾脏纤维化是各种慢性肾脏病（Chronic kidney disease），或者急性肾损伤（Acute kidney injury）后在肾脏未能完全恢复时转化为慢性肾脏病，并进一步发展至终末期肾病的共同途径和主要病理基础。肾脏纤维化主要表现为肾小球硬化和肾间质纤维化，其典型病变特征有：各种炎性细胞浸润、细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）大量堆积、肾脏固有细胞消失以及微血管减少、肾小管上皮细胞和肾脏间质成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化等，并且肾脏纤维化过程不可逆转，患者最终会不可逆地走向肾功能衰竭，正常工作生活被严重干扰，社会经济负担也因此增加。目前，全球约有8.5亿人因各种原因罹患慢性肾脏病，是在全球范围内造成死亡和伤残的重要原因之一。慢性肾脏病在我国的患者达1.323亿，患病率达10.8%，同样给我国的医疗健康体系造成了极大的负担。

肾脏间质纤维化产生机制复杂，一直以来各种动物实验研究对于揭示肾脏间质纤维化的病理特征和分子机制都起到了至关重要的作用。因此，选择构建较理想的肾脏间质纤维化动物模型，对研究肾脏间质纤维化的发生机制、诊断、防治以及延缓其进一步发展等都有着非常重大的意义。

单侧输尿管梗阻（(Unilateral Ureteral Obstruction，UUO）模型广泛应用于梗阻性肾脏疾病的研究，是目前研究肾脏间质纤维化的经典模型之一，但由于对实验人员手术操作能力和操作规范性要求较高等原因，UUO模型的造模往往十分困难。该动物模型的造模方法为动物腹腔注射麻醉后，在左肾门附近切开腹腔，分离并结扎左输尿管，然后闭合腹腔。结扎术后2周，检测会发现其血肌酐和血尿素氮水平较对照组明显升高。单侧输尿管梗阻模型的主要特点是肾小管扩张、间质增生、近端肾小管大量损伤、肾脏积水、白细胞浸润、肾小管上皮细胞死亡以及成纤维细胞增生，从而导致肾脏瘢痕形成，间质纤维化。单侧输尿管梗阻模型建立的优势是周期短、成本低、预测性强，肾结扎术后两周可发生肾脏间质纤维化；另外动物存活率高，可操作空间大。

图1：UUO模型造模过程

图2：假手术组（左）和UUO模型组

（右）的肾脏对比图

成都先导成药性平台可提供小鼠UUO模型，对治疗肾纤维化的受试物进行体内药效学评价。UUO动物模型的肾纤维化可通过Masson或天狼星红等纤维化特殊染色进行组织病理学评价，也可用qRT-PCR、WB、免疫组织化学等方法检测组织样本中肾功能、胶原或者与肾纤维化相关等生物标志物的表达情况。

图3：UUO侧肾脏的组织病理学评价（上）Masson染色代表性图片（下）定量测量纤维化阳性面积占比、纤维化阳性面积，Mean±SD，* p<0.05

图4：qRT-PCR分析UUO侧肾脏的纤维化相关基因表达水平，Mean±SD，* p<0.05，** p<0.01，*** p<0.001

成都先导已经建立了从靶点验证到临床开发的一体化成药性评价平台体系，可以提供包括体外生物学、体内外ADME、DMPK、体内药理药效、non-GLP毒理、CMC开发等技术服务，并且已广泛应用于客户和内部管线新药项目研发过程中，可利用团队的新药研发经验更好地服务于客户的成药性评价需求，在过去的两年中已广泛地开展并成功交付了国内外多个客户服务项目。欲了解更多信息，欢迎咨询成都先导。