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DHX9靶点介绍

RNA解旋酶 靶点 DHX9

01

DHX9背景介绍
DEAH-box helicase 9 (DHX9)是 DEAH-box RNA 解旋酶家族的重要成员。作为一种 ATP 依赖性 RNA 解旋酶,DHX9 可解旋 RNA 或 DNA 双链体,以及 DNA:RNA 杂交体 (R-loops),使其成为 DNA 复制和转录的重要蛋白质。DHX9 与多种细胞过程有关,包括转录、翻译、mRNA 衰变和 RNA 转运.此外,DHX9已成为肿瘤发生的重要参与者感染和自身免疫性疾病。

人DHX9基因位于染色体1q25上的前列腺癌易感位点,假基因DHX9P定位于染色体13q22。该活性基因由29个外显子组成,编码1270个氨基酸,蛋白大小为140 kDa(见图1)。DHX9包含一个由8个基序组成的解旋酶核心结构域。核心区域为两个RecA样结构域,基序I-III位于结构域1中,基序IV-VI位于结构域2中。DHX9 N末端包含2个双链RNA结合结构域(dsRBD)。最小反式激活结构域(MTAD)是RNA聚合酶 II (PolII) 相互作用的位点。解旋酶相关结构域2(HA2)位于解旋酶核心结构域的C末端附近。在DHX9的C末端有一个寡核苷酸/寡糖结合折叠(OB-fold),重叠的核定位/输出信号,以及一个能够结合单链核酸的富含甘氨酸的RGG盒。

图1 DHX9蛋白结构

02

产品及服务
1. 人DHX9 重组蛋白

2. DHX9 抑制剂筛选:两种方法可选择,ADP-Glo 和 Unwinding 实验。

03

实验原理

DHX9 ADP-Glo实验原理见图2, DHX9解螺旋需要消耗ATP,ATP转化成ADP,使用试剂盒检测ADP的生成量来反应DHX9的酶活性,加入试剂盒中的第一个试剂可以将实验中未反应的ATP消耗掉,第二个试剂加入后会将实验中产生的ADP转化为ATP,并且里面含有荧光素酶的底物,最后使用酶标仪的化学发光模块检测信号值。

Unwinding实验原理见图3,底物是由一段Cy5标记的RNA序列,BHQ2标记的DNA序列,同时与RNA互补链进行退火得到的。正常情况下Cy5和BHQ2相互靠近Cy5的荧光可以被BHQ2淬灭掉;当加入DHX9后,开始进行解链,Cy5标记的一段被解链后远离BHQ2,其荧光可在酶标仪Ex/Em:620/685nm处被检测到。

图2 DHX9 ADP-Glo实验原理

图3 DHX9 unwinding 实验原理

04

数据展示

1.DHX9 蛋白表达

2.DHX9 ADP-Glo 实验
DHX9 protein(150-1150)

DHX9 protein-full length

3.DHX9 unwinding 实验

DHX9 protein(150-1150)

DHX9 protein-full length


公司介绍



北京爱思益普生物科技股份有限公司 2010年创建,致力于打造靶点驱动的药物发现生物学平台。作为创新型CRO+的探索者,爱思益普专注于以“新靶点、新方法、新技术”解决创新药从靶点发现到候选化合物确认阶段的生物学和成药性的挑战;同时,爱思益普融合临床医学和生物学的专业团队,基于对疾病生物学及药物研发逻辑的深入理解,建立药物发现“一体化”的生物学平台为客户提供综合解决方案。爱思益普关注新药研发企业对质量、效率和成本的需求,用专业的生物学技术和高效的沟通帮助客户提高新药研发的效率及成功率。

爱思益普建立的技术平台包括:

1、基于靶点的药物筛选平台:建立了超过1500种药物靶点,涵盖大多数离子通道,GPCR,激酶和非激酶靶点以及近万个实验方法,建立了从生物物理学、生物化学、细胞生物学、电生理学平台以及各种多平台和高通量筛选技术。

2、体外和体内药效筛选评价平台:包括肿瘤、免疫、心血管、中枢神经系统、代谢基于细胞、组织或动物模型的药效学评价。

3、早期成药性筛选评价平台:包括药物发现阶段ADME和PK研究,以及药物脱靶效应筛选(hERG,safety panel,激酶谱等)

4、新分子平台:专注于ADC、多肽、蛋白降解、小核酸、细胞治疗等多种新分子的药物发现研究。


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